Adn en la Ciencia Forense
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Adn en la Ciencia Forense en la Ciencia Forense
INTRODUCCIÓN
El ácido desoxirribonucleico (ADN) de la gran mayoría de los humanos es único. La excepción a esto, dados los actuales sistemas utilizados para el análisis forense, son los gemelos idénticos.
Otros Elementos
Además, el ADN es en su mayoría ubicuo (no se encuentra en los eritrocitos). Estas propiedades han hecho del ADN una herramienta importante para la identificación de los individuos, tanto en aplicaciones forenses como de seguridad.
La estructura del ADN
El ADN consiste en dos filamentos retorcidos de polímeros, compuestos de unidades mononucleótidas. Cada nucleótido está compuesto por un azúcar 2-deoxirribosa (“2-deoxi-” porque el grupo hidroxilo o -OH del azúcar de la ribosa falta en la segunda posición del carbono en el anillo de azúcar), un fosfato, y una de las cuatro bases, adenina (A), guanina (G), citosina (C), timina (T). El azúcar desoxirribosa y el fosfato están unidos por puentes fosfodiéster de tal manera que forman una cadena polinucleótida no ramificada.
Según el modelo Watson-Crick, descubierto por James D. Watson (1928) y Francis Crick (1916 2004), publicado en 1953 en la revista Nature, la molécula de ADN consiste en dos cadenas de polinucleótidos que son complementarias pero no idénticas y que giran alrededor de un eje común imaginario. Las dos cadenas son antiparalelas, lo que significa que los enlaces fosfodiesterios entre las unidades de desoxirribosa se leen en direcciones opuestas designadas como 5 primo a 3 primo en una cadena y 3 primo a 5 primo en la otra. Las bases, que son perpendiculares al eje de la hélice, sobresalen a intervalos regulares de las dos cadenas espirales de fosfato de azúcar, y llegan al interior de la hélice.
Más Información
Las hebras son recocidas por enlaces de hidrógeno entre las bases de las hebras opuestas. Para que el recocido sea correcto, una purina (adenina o guanina) en una hebra debe unirse a una pirimidina (timina o citosina) en la otra. Dentro de las limitaciones de la doble hélice, se forman dos enlaces de hidrógeno entre la adenina y el timino (A:T) y tres entre la guanina y la citosina (G:C). A través de este emparejamiento, la disposición de las bases a lo largo de una hebra determina la de la otra, y la información genética se codifica así en estas secuencias o pares de bases (bp).
La estructura de ADN más comúnmente descrita es la de la doble hélice diestra de Watson-Crick, también conocida como ADN-B, que tiene un diámetro de 20 angstroms, o 20Å, que son un orden de 10 más pequeños que los nanómetros. La doble hélice no es simétrica y tiene un surco ancho (surco mayor) y un surco estrecho (menor) entre las cadenas. Las bases adyacentes están separadas por 3,4Å a lo largo del eje de la hélice y relacionadas por una rotación de 36° que hace que la estructura de la hélice se repita después de 10 residuos en cada cadena a intervalos de 34Å.
Puntualización
Sin embargo, el ADN es una molécula dinámica cuya estructura puede variar y hay otras dos conformaciones de ADN que se encuentran comúnmente, cada una con dimensiones ligeramente diferentes.
Algunos Aspectos sobre Adn en la Ciencia Forense
Dentro de una célula, el ADN está organizado en largas cadenas llamadas cromosomas. Cada cromosoma contiene muchos miles de genes diferentes. Un gen es un segmento funcional de ADN que codifica para una proteína específica. Durante la síntesis de las proteínas, una porción de ADN se traduce en una cadena complementaria de ácido ribonucleico (ARN), que a su vez se transcribe en una secuencia de aminoácidos (los bloques de construcción de las proteínas). Se necesita una secuencia de tres nucleótidos para codificar un aminoácido y las cadenas de aminoácidos se modifican aún más fuera del núcleo de la célula en proteínas.
La molécula de ADN es heredada por la mayoría de las células de cada individuo.Entre las Líneas En la reproducción asexual, el ADN de los cromosomas se desenrolla y se duplica antes de que la célula se divida. Ambas células hijas reciben copias exactas del ADN de la célula madre.Entre las Líneas En la reproducción sexual, una porción del ADN se hereda tanto del padre como de la madre.Entre las Líneas En los seres humanos, hay 23 pares de cromosomas en el genoma. Durante la meiosis, que forma las células sexuales o gametos (el óvulo en las mujeres y el esperma en los hombres), los pares cromosómicos se separan y cada gameto recibe 23 cromosomas no apareados. Cuando un espermatozoide fertiliza un óvulo, sus 23 cromosomas no apareados se emparejan con los 23 cromosomas no apareados del óvulo, y el cigoto resultante contiene un conjunto único de cromosomas apareados.
El descubrimiento del ADN y las notas históricas
En 1962, el Premio Nobel de Fisiología o Medicina fue otorgado a Francis Crick, James Watson y Maurice Wilkins (1916 2004). Aunque otros antes habían contribuido a la investigación de temas que iban desde los factores de la herencia hasta los patrones de difracción, no fue sino hasta el artículo de 1953 que el ADN se detalló amplia y explícitamente.
Además de los tres científicos nombrados ganadores del Premio Nobel, Rosalind Elsie Franklin (1920 1958) contribuyó significativamente al proyecto pero no estaba viva cuando se otorgaron los premios. Murió en 1958 a la joven edad de 37 años.
LOS PRIMEROS TRABAJOS FORENSES
La tipificación del ADN es una forma de categorizar la composición genética de un individuo para distinguir un individuo de otro. Esto ha sido posible gracias a la rápida aceleración de las tecnologías basadas en la genómica, junto con el hecho de que el ADN genómico humano, que está compuesto por 3.000 millones de bases (letras del alfabeto (véase su definición, y la información relativa al Alfabeto Griego, al Alfabeto y sus orígenes, al Alfabeto Latino y al Alfabeto Árabe) del ADN), es único en sólo el 0,1 por ciento de su composición. (Tal vez sea de interés más investigación sobre el concepto).
Una Conclusión
Por lo tanto, aproximadamente 3 millones de bases difieren de una persona a otra, lo que permite a los científicos utilizar estas diferencias para realizar comparaciones de identidad con un alto grado de certeza. Estas regiones variables del ADN pueden utilizarse para generar un perfil de ADN de un individuo, utilizando muestras de sangre, hueso, cabello, semen y saliva, así como otros tejidos corporales.
Desarrollo
En la tipificación del ADN, hay varios sistemas que pueden emplearse para caracterizar el ADN de una muestra. Estos sistemas tienen diferentes aplicaciones y propósitos.
Polimorfismo de Longitud de Fragmentos de Restricción (RFLP) – Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)
Los científicos forenses tratan de obtener ADN de la escena del crimen para analizar un conjunto específico de marcadores de ADN (regiones del genoma que son variables) rápidamente, pero con buenos resultados. Los sistemas de tipificación del ADN que se han utilizado anteriormente o se utilizan actualmente en la ciencia forense (véase conceptos relacionados con este término, y véase asimismo criminalística) incluyen la tipificación del polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción (RFLP), el análisis de repetición en tándem corto (STR), la tipificación del polimorfismo de un solo nucleótido (SNP), el análisis del ADN mitocondrial (mtADN), la tipificación del antígeno leucocitario humano (HLA), la tipificación del género y la tipificación del cromosoma Y. El análisis de RLFP fue el primer gran sistema de tipificación de ADN utilizado en la medicina forense. Todas las técnicas que siguieron no podrían haberse desarrollado sin el descubrimiento de una revolucionaria metodología llamada reacción en cadena de la polimerasa (PCR). La PCR permite a un científico amplificar o copiar fragmentos de ADN genómico (pequeñas secuencias de hasta unos pocos miles de bases de longitud) extraídos de una muestra para que haya cantidades suficientes para ser analizadas.
El análisis RFLP fue desarrollado por primera vez por Sir Alec Jefferies.Entre las Líneas En el análisis RFLP, el ADN genómico se digiere con una enzima molecular que corta el ADN en secuencias específicas que reconoce, creando múltiples fragmentos. Estos fragmentos pueden ser de tamaño variable dependiendo de si la enzima corta en un lugar determinado del ADN. El ADN variable que se hereda (y no se muta) en un sitio puede o no ser cortado por la enzima dependiendo de si la secuencia contiene el sitio de reconocimiento de la enzima. Estos sitios pueden ser muy variables en función de los patrones de herencia. Por esta razón, se producirá un patrón de fragmentos basado en el número de sitios de corte, separados por electroforesis en gel. Transferidos a una membrana de nitrocelulosa, y utilizando sondas radiomarcadas (secuencias cortas de ADN que se unen a la secuencia complementaria del ADN de la muestra) que se unen a secuencias específicas de interés, pueden ser identificados por autorradiografía.
Las sondas radiomarcadas se visualizan por autorradiografía, un proceso que desarrolla un trozo de película que tiene la “imagen” de las bandas radiomarcadas, separadas en función de su tamaño, que corrieron en el gel durante la electroforesis en gel. Si falta un sitio de restricción en el ADN de un individuo en un lugar específico, la enzima no lo cortará y el fragmento será por lo tanto más grande. El análisis RFLP no siempre es aplicable porque requiere una gran cantidad de ADN de alto peso molecular (HMW). Las muestras forenses obtenidas en la escena del crimen a menudo tienden a degradarse. Aunque el RFLP es una de las aplicaciones originales del análisis de ADN que utilizaban los investigadores forenses, las técnicas de análisis de ADN más recientes y eficaces han sustituido a esta tecnología, como el desarrollo de la PCR.
Más Detalles
Los ensayos basados en la PCR siguieron al análisis RFLP debido a su mayor sensibilidad, simplicidad y facilidad para analizar muestras de ADN degradado. La PCR puede amplificar cantidades extremadamente pequeñas de ADN (incluso ADN de una sola célula) a grandes concentraciones de ADN (nanogramos). Utilizando la PCR para amplificar una secuencia específica de interés, que contiene una secuencia variable dentro del amplicón (fragmento de PCR amplificado), se puede realizar el análisis de STR. Las STR son repeticiones cortas en tándem de dos a cinco pares de bases que se repiten de unas pocas a docenas de veces. La mayoría de los marcadores STR utilizados en el análisis forense son de cuatro pares de base de longitud. La identificación de las STR puede realizarse mediante el análisis de fragmentos de ADN, utilizando la electroforesis en gel.Entre las Líneas En este proceso los fragmentos de ADN se separan en función de su tamaño. Para ello, cada conjunto de cebadores de amplificación utilizados en el kit de amplificación tiene un cierto color de fluoróforo unido a él. Esto a su vez permite la visualización de fragmentos específicos, asociados con loci específicos, después del proceso de electroforesis. Los fragmentos migran a través del sistema de electroforesis capilar (CE), con las “etiquetas” de color pasando por un láser. El láser excita el fluoróforo causando una emisión de luz asociada a un fragmento específico. Esta información es luego registrada por una cámara de dispositivo de acoplamiento cargado (CCD), lo que permite al software de la computadora determinar el tamaño del par de base de ese fragmento coloreado en particular. Como el tamaño de los loci STR amplificados está en el rango de 100 a 500 pares de bases, lo hace ideal para muestras de ADN degradadas.
Después del descubrimiento de la PCR, un sistema de tipificación de ADN que se utilizó en la medicina forense fue el sistema HLA DQa/HLA DQA1, o sistema de Antígeno Leucocitario Humano (HLA). Este sistema está compuesto por un área base de 242 en el genoma que es altamente variable en la población. (Tal vez sea de interés más investigación sobre el concepto). Puede detectarse mediante sondas moleculares que buscan subregiones complementarias dentro de esta región genética. El conjunto de sondas para HLA DQa comenzó con seis sitios comunes llamados alelos DQ que, al combinarse, produjeron 21 genotipos posibles. Con sólo un locus o región del genoma utilizado, el valor predictivo fue inferior al del análisis RFLP u otros ensayos basados en la PCR. El sistema HLA DQA1 mejoró el análisis al detectar 28 genotipos posibles. El AmpliType PMþDQA1, otro locus relacionado con HLA, fue desarrollado para ampliar el sistema HLA DQ. Utiliza varios marcadores en diferentes loci, analizados simultáneamente (también llamado multiplexación). Con cinco marcadores adicionales analizados, la potencia estadística aumenta considerablemente.
Otras Cuestiones referentes a Adn en la Ciencia Forense
La presencia de secuencias de ADN únicas permite a los científicos forenses identificar secuencias de firmas que pueden utilizarse posteriormente como sondas para detectar organismos individuales o para detectar un gen en particular. Los cambios de incluso un par de bases pueden detectarse fácilmente por la mayoría de las técnicas de hibridación y por secuenciación.
Las secuencias de firmas son particularmente importantes para el diagnóstico de los virus, que son los patógenos que carecen de genes ribosómicos o mitocondriales. Su detección e identificación se simplifica enormemente con el uso de estas secuencias, ya que los métodos tradicionales pueden tardar hasta unas pocas semanas.
Las secuencias únicas de ADN también pueden utilizarse para diseñar primers (fragmentos cortos de ADN necesarios para iniciar la amplificación del ADN) para la PCR. Hay suficientes diferencias entre todos los genes de un mismo organismo, así como entre los organismos de diferentes especies, para garantizar que los cebadores seleccionados sólo amplifiquen la secuencia objetivo, incluso si hay una mezcla de diferentes moléculas de ADN. Esto permite a los científicos diseñar pruebas de diagnóstico e identificación para los patógenos y enfermedades comunes y para partes del genoma de un patógeno.
Aunque todos, excepto los gemelos idénticos, tienen un ADN único, la identificación de un individuo no se basa en la secuenciación de su genoma.Entre las Líneas En su lugar, se utiliza para la identificación el análisis del ADN mitocondrial en una región de un bucle de desplazamiento (bucle D o región de control) o de repeticiones cortas en tándem (STR).
El análisis del bucle D se utiliza para la identificación individual en el análisis forense. Esto es posible debido a los polimorfismos de esas secuencias que resultan de las sustituciones de pares de bases durante el proceso de replicación del ADN (por ejemplo, en lugar de A, la ADN polimerasa incorpora T).
El principal método utilizado para la identificación de los cambios en esta región es la amplificación y secuenciación de la PCR.
Puntualización
Sin embargo, otros métodos como la hibridación y el uso de corrientes eléctricas se han hecho mucho más frecuentes en los últimos años.
Perfiles de ADN
El perfil de ADN es el análisis genético molecular que identifica los patrones de ADN.Entre las Líneas En la ciencia forense (véase conceptos relacionados con este término, y véase asimismo criminalística), el perfil de ADN se utiliza para identificar a los que han cometido un delito o para identificar la fuente de las manchas de sangre desconocidas encontradas en la escena. Se estima que aproximadamente el uno por ciento de todos los casos penales emplean esta técnica.
Puntualización
Sin embargo, el análisis de ADN se ha utilizado para absolver a varios sospechosos acusados de delitos graves, como violación y asesinato, y se ha empleado para condenar a personas por delitos años después de que los investigadores cerraran el caso no resuelto.
Observación
Además de identificar a un individuo responsable de delitos violentos, el sistema judicial también puede utilizar el análisis de ADN para determinar las relaciones familiares en el caso de disputas sobre la paternidad o para casos de inmigración.
Revisión de hechos: Robert [rtbs name=”ciencia-forense”]
Adn en la Ciencia Forense en la Ciencia Forense
El análisis molecular del ADN también se ha utilizado en el diagnóstico de trastornos clínicos. Muchas enfermedades genéticas son causadas por mutaciones en el ADN dentro de las regiones del genoma que codifican para la proteína, y los científicos buscan en estas regiones mutaciones para determinar si un paciente está afectado por una enfermedad genética o es portador de ella. A diferencia de la genética molecular clínica, la tipificación del ADN para la medicina forense aprovecha las ubicaciones dentro del genoma humano que no codifican para la proteína. Estas localizaciones típicamente implican secuencias repetitivas de ADN que son polimórficas, o tienen un número variable de tamaños de repetición. (Tal vez sea de interés más investigación sobre el concepto). Dado que se utiliza ADN no codificador, las bases de datos de ADN que contienen información sobre la tipificación del ADN no revelan ninguna información sobre el estado de salud de un individuo o si el individuo tiene o es portador de una enfermedad genética.
La sensibilidad de las pruebas de perfiles de ADN ha aumentado dramáticamente en las últimas décadas. Antes era necesario tener una muestra de aproximadamente el tamaño del cartucho de tinta de un bolígrafo de tinta. La velocidad a la que se pueden obtener los resultados también ha mejorado drásticamente. Esto se debe en gran parte al descubrimiento de la PCR, así como a los avances en las herramientas de huellas dactilares de ADN. Gracias a estos avances, los científicos forenses pueden ahora obtener suficiente ADN de la saliva que queda en la punta de un cigarrillo para obtener un resultado de perfil de ADN.
Huella de ADN
La huella de ADN se basa en el ADN analizado de las regiones del genoma que separan los genes llamados intrones. Los intrones son regiones dentro de un gen que no codifican para las proteínas. Se empalman durante el procesamiento del ARN mensajero, que es una molécula intermedia que permite al ADN codificar la proteína. Esto contrasta con el análisis de ADN que busca mutaciones causantes de enfermedades, donde la mayoría de las mutaciones involucran regiones en los genes que codifican para la proteína llamada exones. El análisis de ADN suele implicar a los intrones porque los exones están mucho más conservados y, por lo tanto, tienen menos variabilidad en su secuencia.
HISTORIA.
Más Información
Las huellas de ADN se utilizaron por primera vez para la identificación de muestras después de que el genetista Sir Alec J. Jeffreys (1950) de la Universidad de Leicester en Gran Bretaña descubriera que hay patrones de material genético que son únicos para casi todos los individuos. Llamó a estas secuencias repetitivas de ADN “minisatélites”.
Informaciones
Los dos usos principales de la información proporcionada por el análisis de las huellas dactilares de ADN son la identificación personal y la determinación de la paternidad.
Algunos Aspectos sobre Adn en la Ciencia Forense
El procedimiento original de toma de huellas de ADN utilizaba repeticiones en tándem de número variable (VNTR), que son secuencias repetitivas de ADN que se extienden por todo el genoma en regiones no codificantes. Estos objetivos son grandes, con números de repetición que varían de una persona a otra y tienen un tamaño de repetición compuesto de cientos de nucleótidos que pueden repetirse cien veces.
La huella del ADN se utilizó originalmente para identificar enfermedades genéticas mediante la vinculación de los genes de la enfermedad dentro de una familia basada en la herencia de los marcadores de segregación y la probabilidad de que estuvieran muy cerca, pero también se utilizó para las investigaciones penales y la ciencia forense.Entre las Líneas En general, los tribunales de los Estados Unidos aceptan la fiabilidad de los análisis de ADN y han incluido estos resultados como prueba en muchos casos judiciales.
Puntualización
Sin embargo, la exactitud de los resultados, el costo de las pruebas y el mal uso de la técnica han hecho que sea controvertida.
NUCLEAR VS. ADN MITOCONDRIAL. El ADN puede ser extraído de dos fuentes diferentes dentro de la célula. El ADN que se encuentra en el núcleo de la célula, también llamado ADN nuclear (ADNn) es más grande y contiene toda la información que nos hace ser quienes somos. Está estrechamente ligado a estructuras llamadas cromosomas. El ADN también se puede encontrar en un orgánulo dentro de la célula llamado mitocondria, que funciona para producir energía que impulsa todos los procesos celulares necesarios para la vida. El ADN mitocondrial (ADNmt) es mucho más pequeño, contiene sólo 16.569 bases de nucleótidos (comparado con el ADNn, que contiene 3.900 millones) y no está enrollado en los cromosomas.
Indicaciones
En cambio, es circular y hay muchas copias de él.
El ADN nuclear se analiza en pruebas que contienen sangre, semen, saliva, tejidos corporales y folículos pilosos. El ADN de las mitocondrias, sin embargo, se suele analizar en pruebas que contienen fragmentos de pelo, huesos y dientes.
Desarrollo
Análisis de ADN mitocondrial
Otro sistema de tipificación del ADN, que se utiliza con frecuencia en el análisis forense del ADN, es el análisis del ADNmt, que suele realizarse en los casos en que la cantidad de muestra es insuficiente, el ADNn no es informativo o si se necesita información complementaria.
LA COMPOSICIÓN Y LA FUENTE DEL ADNMT. Como se ha señalado anteriormente, el ADNmt tiene una longitud aproximada de 16.569 pares de bases y el genoma suele encontrarse en una conformación anular. Hay dos partes principales de la molécula. Una región codificante representa la mayoría de la molécula y el ADN de esta sección codifica los productos bioquímicos relacionados con el suministro de energía a la célula.
La otra sección del ADNmt se denomina región de control y se encarga de regular la producción de los productos génicos de la región codificante. Dentro de la región de control hay dos regiones que se ha comprobado que contienen un número desproporcionado de variaciones en los seres humanos. Estas regiones se denominan Región Hipervariable 1 y Región Hipervariable 2, o HV1 y HV2. El HV1 es aproximadamente 342 pares de base (pb) y el HV2 es aproximadamente 268 pb.
El ADN mitocondrial proviene de una fuente separada del ADN que se encuentra en el núcleo. Es mucho más pequeño (sólo 16,5 mil bases) que el ADN nuclear y es importante para producir proteínas que son cruciales y específicas para la producción de energía dentro de la célula. La ventaja de utilizar el mtADN es que muchos tejidos (como el músculo) tienen un número de copias de mtADN mucho mayor que el ADN nuclear, que sólo tiene dos copias de información genética y dos cromosomas sexuales. Para las muestras con poco ADN recuperado, el análisis del mtADN es el enfoque preferido. También es importante para las muestras que no tienen núcleo, como los glóbulos rojos, el cabello sin raíz, los huesos, los recortes de uñas y los dientes. Para estos tejidos, no se puede utilizar el análisis de STR y RFLP.
Basado en la experiencia de varios autores, mis opiniones, perspectivas y recomendaciones se expresarán a continuación (o en otros lugares de esta plataforma, respecto a las características en 2026 o antes, y el futuro de esta cuestión):
Detalles
Por último, el análisis de ADNmt es posible debido a una región altamente variable (de 1 a 2 por ciento en individuos no relacionados) en el genoma de ADNmt llamada “D-loop”. La región del bucle D tiene una longitud de 1.274 pares de bases y se encuentra entre los genes que codifican el ARN de transferencia (ARNt) para la prolina y el ARNt para la fenilalanina. Contiene las regiones reguladoras de la replicación de otros genes. La secuenciación del bucle D proporciona la información de identificación que constituye las bases del análisis del mtADN.
El análisis del cromosoma Y sólo es aplicable en los casos en que la prueba de identidad coincida en los varones. Los cromosomas Y sólo pueden ser heredados por los hijos de sus padres. También puede estar asociado (véase qué es, su concepto jurídico; y también su definición como “associate” en derecho anglo-sajón, en inglés) con cualquier otro varón de la línea paterna (o patrilineal) (es decir, abuelo, tío, hermano, primo, etc.) También puede ser útil para probar a los sospechosos varones cuando se han identificado múltiples fuentes de muestras en el lugar del delito. La tipificación de los sexos también puede realizarse analizando el cromosoma X y determinando si hay un alelo (masculino) o dos alelos diferentes (femenino) en un lugar informativo.
Más Detalles
A diferencia del ADNn, donde una copia de un cromosoma proviene del padre y la otra de la madre, el ADNmt se hereda exclusivamente del lado materno. Cuando un espermatozoide fertiliza un óvulo, la cabeza del espermatozoide que contiene ADN se fusiona con el óvulo, pero la cola y la sección media se dejan en el exterior del óvulo. Las mitocondrias de un espermatozoide se encuentran en la cola y en el centro, ya que estas partes requieren energía para impulsar el espermatozoide. Debido a que las mitocondrias de los espermatozoides nunca llegan al interior del óvulo, todas las mitocondrias del embrión provienen del óvulo. Como resultado, el ADN mitocondrial de un niño es idéntico al de la madre. El ADN mitocondrial es por lo tanto útil para probar las relaciones maternas en las investigaciones forenses.
Esto puede ser útil en los casos en que no es posible obtener una muestra del sospechoso pero sí de uno de sus familiares biológicamente relacionados. De ese modo, el sospechoso puede quedar excluido como culpable de un delito si los resultados indican que el ADNmt del familiar correspondiente no coincide con la huella dactilar de ADNmt de la muestra.
Una de las principales razones por las que el análisis del ADNmt puede ser útil para los científicos forenses es que en algunos tejidos, el ADNmt es excesivo en comparación con el ADNn. Como el nADN existe en los cromosomas y sólo hay dos copias de cada cromosoma (una heredada por vía materna y otra por vía paterna) por célula, el número de copias de nADN es mucho menor. El genoma mitocondrial puede tener un número de copias de 2 a 10 por orgánulo y en algunos casos el número de orgánulos puede llegar a los cientos. Por ejemplo, en el tejido muscular, donde la demanda de energía es mayor, hay un mayor número de copias del genoma mitocondrial. El análisis del ADNmt, por lo tanto, puede ser particularmente útil en los casos forenses en los que la integridad o el tamaño de la muestra se ven comprometidos o cuando se necesita confirmación.
ANÁLISIS DE ADNMD. Hay cinco pasos principales para el análisis del ADNmt. Primero, la muestra se examina visualmente, se limpia y se prepara. La limpieza es extremadamente importante porque las células extrañas de la manipulación pueden contaminar fácilmente una muestra. Normalmente la muestra se sumerge en detergente y en un baño de ultrasonidos.
Informaciones
Los dientes y los huesos se lijan y se seccionan transversalmente.Entre las Líneas En los dientes, la dentina y la pulpa se utilizan en el análisis.Entre las Líneas En todos los casos, la muestra se muele hasta convertirla en polvo y luego se coloca en una solución de extracción para liberar el material celular, incluido el ADNmt, de las células.
El segundo paso consiste en extraer el ADNmt del material celular. Esto se logra añadiendo a la solución una mezcla de productos químicos que separan el ADN de otras moléculas orgánicas y luego haciendo girar la mezcla en una microcentrífuga. El mtADN se concentra en la capa superior y luego se purifica. El tercer paso implica una técnica llamada reacción en cadena de la polimerasa (PCR), que utiliza ciclos de calentamiento y enfriamiento cuidadosamente regulados para producir muchas copias del mtADN. Este proceso se denomina amplificación.
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Tras la amplificación, el producto de ADNmt se purifica y cuantifica para asegurar que la PCR produzca la cantidad esperada de ADNmt. El paso final del análisis del ADNmt es la secuenciación del ADNmt amplificado. Esto se hace utilizando una técnica similar a la PCR, pero se añaden a la solución nucleótidos específicos marcados con fluorescencia que terminan el crecimiento de una hebra. Esta técnica se conoce como el método de Sanger y el resultado son muchas hebras de ADN que varían en longitud por un nucleótido. Esta colección de ADN se clasifica entonces por longitud, utilizando una técnica llamada electroforesis en gel. Un detector de fluorescencia lee entonces los nucleótidos etiquetados al final de cada hebra de ADN y el software de la computadora reconstruye la secuencia de ADNmt (se puede analizar algunas de estas cuestiones en la presente plataforma online de ciencias sociales y humanidades). Finalmente, un examinador de ADN edita y verifica la secuencia.
Al realizar el análisis del ADNmt, se secuencian unos 610 pb y se comparan con una secuencia estándar conocida de ADNmt. Los nucleótidos de la secuencia de la muestra que difieren de este estándar se enumeran por ubicación y nucleótido. Por ejemplo, si una muestra contuviera citosina en la posición 263 mientras que el estándar contuviera adenina en esa posición, los resultados se presentarían como 263 C.
EL FBI Y EL ADN. La Oficina Federal de Investigación (FBI) ha estado utilizando el ADNmt para resolver crímenes desde 1996. Para 2009, había procesado más de 4.839 perfiles de 14 poblaciones étnicas diferentes mediante el análisis del ADNmt y había establecido la Base de Datos Nacional de ADN de Personas Desaparecidas para reunir información sobre personas desaparecidas para la comunidad encargada de hacer cumplir la ley. También se puede acceder a una base de datos de ADN mitocondrial a través del software del Sistema de Índice Combinado de ADN (CODIS) del FBI, que se examina con más detalle más adelante en esta entrada.
El ADN mitocondrial se ha utilizado con éxito en una amplia gama de casos, como la resolución de casos de personas desaparecidas, la identificación de restos humanos y de víctimas de catástrofes.
En Europa, la elaboración de perfiles de ADNmt se ha venido practicando desde varios años antes de que se iniciara el programa en los Estados Unidos. Su base de datos también está creciendo constantemente.Entre las Líneas En 2008, había 4.527 datos de ADNmt en línea. Y, hasta 2012, había 16.121 haplotipos disponibles.
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Recursos
[rtbs name=”informes-jurídicos-y-sectoriales”]Adn en la Ciencia Forense en Inglés
Una traducción de adn en la ciencia forense al idioma inglés es la siguiente: DNA in medical science .
Véase También
Recursos
[rtbs name=”informes-jurídicos-y-sectoriales”]Adn en la Ciencia Forense en Inglés
Una traducción de adn en la ciencia forense al idioma inglés es la siguiente: DNA in forensic science .
Véase También
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